分子生物 DNA重組技術

Gene重組步驟

1. 基因選取
2. 載體選擇
3. 基因植入(轉殖法)
4. 菌體複製及表現

DNA處理

• 嗜菌體：感染細菌將DNA包覆在蛋白質外鞘內在侵入後釋放片段。
• 電穿孔法(electroporation)：細胞溶液中施加電壓造成細胞膜穿孔。
• 顯微注射(microinjection)：顯微探針注射DNA
• 基因槍：將DNA覆著在金屬微粒上打入細胞中，主要用於植物細胞。

PCR

• 引子深度0.1~0.5nm
• 循環數30以下
• 核苷類深度20~200nm
• Mg2+   0.5~2.5mm
• 鹼性溶液
• DNA長度Kb